Cách thức hoạt động tỷ số bóng đá hôm nay Lipid Rection
Chúng tôi sử dụng máy quang phổ khối song song với một tế bào va chạm (buồng nơi xảy ra sự phân mảnh) giữa hai thông số khối lượng("Triple Quad"; chúng tôi có một API Biosystems API 4000 ứng dụng và một hệ thống sinh học ứng dụng Q-b-b-b-b-b-b-b-b-b-b-b-b-b-b-b-bt Giới thiệu mẫu tỷ số bóng đá hôm nay chúng tôi là ion hóa electrospray.+ion, MGDG, DGDG, PG, PI, PA và PS được phân tích dưới dạng phụ trách đơn vị [M + NH4]+ion và lysopg là âm [m-h]-ion. tỷ số bóng đá hôm nay ion có sẵn để phân tích phụ thuộc vào dung dịch trong đó tỷ số bóng đá hôm nay lipid được hòa tan và trên điện áp nguồn.
Bên trong máy quang phổ khối tứ giác, tỷ số bóng đá hôm nay ion nằm trong điện trường. Ở một cường độ điện trường nhất định, tỷ số bóng đá hôm nay ion của một tỷ lệ khối lượng/điện tích cụ thể sẽ di chuyển thẳng về phía máy dò ở cuối đường ion phổ khối lượng song song.
Đối với phổ tiền thân (quét), chúng tôi đặt thông số khối thứ hai tại một trường điện không đổi chỉ cho phép tỷ số bóng đá hôm nay ion có khối lượng tương ứng với một đoạn tích điện đặc trưng được tạo ra từ nhóm đầu lipid cực để chuyển sang phát hiện. Sau đó, chúng tôi quét với thông số khối đầu tiên.32952_33144Do đó, quang phổ chỉ hiển thị tỷ số bóng đá hôm nay lipid có đoạn nhóm đầu đó. Thông thường, điều này tương ứng với lipid trong một lớp nhóm đầu.
Phổ mất trung tính cũng cho thấy tỷ số bóng đá hôm nay lipid trong một lớp duy nhất, nhưng chúng tôi có được loại phổ này khi điện tích không định vị vào nhóm đầu lipid sau khi phân mảnh. Trong tỷ số bóng đá hôm nay lipid này, tỷ số bóng đá hôm nay ion diacylglycerol tạo ra khối lượng khác nhau như là một hàm của thành phần acyl ion phân tử, nhưng sự khác biệt về khối lượng giữa ion phân tử và tỷ số bóng đá hôm nay đoạn DAG tích điện là không đổi (tương ứng với nhóm đầu).
34306_34453
Một loạt tỷ số bóng đá hôm nay lần quét tiền chất và mất trung tính được thực hiện tuần tự (xem bảng bên dưới).
tỷ số bóng đá hôm nay chức năng quét được thực hiện tuần tự
chế độ quét | Đoạn tiền thân hoặc phần mất trung tính | Lớp tỷ số bóng đá hôm nay được phát hiện |
+ | Prec 184 | PC/lysopc/sm |
+ | NL 141 | PE/Lysope |
+ | NL 185 | PS |
+ | NL 277 | PI |
+ | NL 189 | PG |
+ | NL 115 | PA |
+ | NL 179 | MGDG |
+ | NL 341 | DGDG |
- | Prec 153 | Lysopg |
tỷ số bóng đá hôm nay loài phân tử được xác định bởi (1) sự hiện diện của một đoạn nhóm đầu cụ thể và (2) khối lượng. Khối lượng thường cho phép chúng ta gán một số lượng cacyl cụ thể và số lượng liên kết kép.
Sửa chữa được áp dụng cho dữ liệu cho "chồng chéo đồng vị". Hiện tượng này là do sự phong phú tự nhiên khoảng 1% tỷ số bóng đá hôm nay13c. Điều này có nghĩa là một ion phân tử với 50 carbon, chẳng hạn, sẽ tạo ra không chỉ một, mà là một loạt tỷ số bóng đá hôm nay đỉnh: (1) một đỉnh ở khối "danh nghĩa", A;13C nguyên tử, với 56% tín hiệu của đỉnh A; (3) Một đỉnh ở A+2, từ tỷ số bóng đá hôm nay loài chứa hai13C nguyên tử, với 15% tín hiệu của cực đại; (4) Một đỉnh ở A+3, từ tỷ số bóng đá hôm nay loài chứa ba13C nguyên tử, với 3% tín hiệu tỷ số bóng đá hôm nay cực đại. Do sự hiện diện/vắng mặt tỷ số bóng đá hôm nay một liên kết kép trong một loài lipid gây ra sự khác biệt chỉ hai đơn vị khối lượng, đỉnh A+2 tỷ số bóng đá hôm nay một loài sẽ tạo ra tín hiệu ở cùng khối lượng với đỉnh A tỷ số bóng đá hôm nay một loài khác (bão hòa hơn).
Sau tỷ số bóng đá hôm nay hiệu chỉnh này, tỷ số bóng đá hôm nay đỉnh trên quang phổ làĐịnh lượngSo với một nhómTiêu chuẩn nội bộ.Nói chung, hai tiêu chuẩn nội bộ tỷ số bóng đá hôm nay mỗi lớp nhóm đầu được sử dụng. Chúng tôi cũng cố gắng hết sức để trừ bất kỳ tín hiệu nào có thể là do mức độ gây ô nhiễm thấp trong hỗn hợp tiêu chuẩn nội bộ tỷ số bóng đá hôm nay chúng tôi.
Người dùng của Phòng thí nghiệm phân tích Trung tâm nghiên cứu Lipidomics Kansas có thể cung cấp cho chúng tôi trọng số hoặc tỷ số bóng đá hôm nay giá trị khác để chuẩn hóa dữ liệu.Dữ liệu cho mỗi loài phân tử lipid sẽ được trình bày dưới dạng NMOL (mỗi trọng lượng) và/hoặc là mol% tỷ số bóng đá hôm nay tổng số lipid được phân tích.
Phương pháp mất tiền chất và trung tính mà chúng tôi thường xuyên sử dụng độ tương phản với tỷ số bóng đá hôm nay lần quét ion "sản phẩm" được sử dụng thường hơn trong đó thông số khối lượng đầu tiên được giữ ở trường điện không đổi, tương ứng với khối lượng ion phân tử cụ thể, trong khi quét được thực hiện với tỷ số bóng đá hôm nay phân đoạn. Quét ion sản phẩm có thể được sử dụng để xác định nhóm đầu hoặc tỷ số bóng đá hôm nay mảnh khác được tạo ra, cũng như để xác định tỷ số bóng đá hôm nay nhóm acyl béo trong tỷ số bóng đá hôm nay loài phân tử lipid phân cực cụ thể, khi cần phân tích bổ sung này.
Tài liệu tham khảo:
Brügger, B., G. Erben, R. Sandhoff, F. T. Wieland và W. D. Lehmann. 1997.Phân tích định lượng tỷ số bóng đá hôm nay màng sinh học ở mức picomole thấp bằng phương pháp quang phổ khối ion hóa nano-electrospray.Proc. Natl.
Welti, R., W. Li, M. Li, Y. Sang, H. Biesiada, H. Zhou, C.B. Rajashekar, T.D. Williams và X. Wang. 2002.39429_39563. J. Biol.
Xiao, S., Gao, W., Chen, Q.-F., Chan, S-W., Zheng, S. -x., Ma, J., Wang, M., Welti, R., và Chen, M.-L. (2010).39833_39958Tế bào thực vật 22, 1463-1482.Lưu ý: Phương pháp hiện tại tỷ số bóng đá hôm nay chúng tôi được mô tả trong dữ liệu bổ sung.