tỷ số bóng đá pháp

Kỹ thuật tỷ số bóng đá pháp có chọn lọc DNA và trong các điều kiện được kiểm soát, có thể được sử dụng để xác định trắc quang hàm lượng DNA. Phản ứng chấp nhận hai bước. Vật liệu cố định được xử lý trong 8-10 phút với 1N HCl trong bể nước hoặc lò nướng ở 60 ° C. Sau đó, vật liệu ngay lập tức được chuyển vào thuốc thử của Schiff ở nhiệt độ phòng (trong ít nhất 30 phút hoặc cho đến khi mô màu tím sâu). Các vật liệu sau đó được ép trong acetocarmine hoặc aceto-orcein. Bạn nên phân tích vật liệu trong cùng một ngày, tuy nhiên, nó có thể được giữ ở 4 ° C trong vài ngày nếu cần thiết.

Sự thủy phân axit loại bỏ các cơ sở purin từ DNA, do đó mở ra các nhóm aldehyd tự do. Các nhóm aldehyd sau đó phản ứng với thuốc thử của Schiff, dẫn đến tỷ số bóng đá pháp màu tím. RNA không bị thủy phân bằng cách điều trị HCL và do đó, phản ứng là đặc hiệu DNA.

tỷ số bóng đá pháp thử của Schiff

tỷ số bóng đá pháp thử của Schiff được điều chế bằng cách đổ 200 ml nước cất sôi trên 1 g fuchsin cơ bản. Lắc kỹ, nguội đến 50 ° C, lọc và thêm 30 ml 1N HCl vào dịch lọc. Nhiệt độ mát đến phòng và thêm 1 g metabisulfite (K₂S₂O₅). Cho phép giải pháp đứng qua đêm trong bóng tối hoặc cho đến khi một ống hút màu hoặc màu hồng mờ phát triển. Nếu không hoàn toàn được khử màu, thêm bột than 0,5 g, lắc, lọc qua bộ lọc thô và làm lạnh trong một chai được dừng chặt chẽ trong bóng tối. tỷ số bóng đá pháp thử Schiff được chuẩn bị thương mại có thể được lấy từ một số công ty (tức là, Fisher Khoa học #SS32-500).