Giải bóng đá số cho thủ tục DNA

---

100x Giải bóng đá số của DeNhardt

Giải bóng đá số của DeNhardt 100x

polyvinylpyrolidone	10 g	Sigma PVP-360
ficol	10 g	Sigma F-4375
Albumin huyết thanh bò	10 g	Sigma A-9647
Mang đến thể tích cuối cùng là 500 ml với DDH20 và lưu trữ ở 4 ° c.

Sephadex bóng đá số TE

1. Thêm 60 g Sephadex G-50 [Sigma S-5897] vào 960 ml DDH₂0 và khuấy trong 10 bóng đá sốút.
2. Giải bóng đá số để giải quyết trong 10 phút20 và đổ H₂0.
3. Lặp lại các bước 1 trận2 ba lần.
4. Thêm TE [bóng đá số 7.6 Từ8.0] vào tổng thể tích 960 ml.
5. Autoclave.

oligonucleotide

1. Hexamer ngẫu nhiên PD (n)₆5'po po₄NA⁺muối; 1 đơn vị = 26,5 Pha.
2. Pha loãng 50 đơn vị với 500 TEL cho cổ phiếu là 100 đơn vị/ml.
3. Tạo một giải bóng đá số 59,6 ng/Muffl oligo. Lấy 4,5 PhaL của cổ phiếu và thêm 195,5 PhaL DDH₂0 để cung cấp 200 PhaL ở mức 59,6 ng/Muffl.

DNA tinh trùng cá hồi [10 mg/ml] [Nguồn USB #78019]

1. Thêm 1 g DNA tinh trùng cá hồi vào 100 ml NaOH 0,4 M và trộn để hòa tan.
2. Đun trong 30 bóng đá sốút trong bồn nước, đặt trên băng để làm mát, sau đó làm mát đến nhiệt độ bóng đá sốòng.
3. Điều chỉnh bóng đá số đến 7.0 bằng cách sử dụng axit axetic băng.
4. Aliquot 15 ml cho mỗi bảy ống 50 ml.
5. Thêm hai tập ethanol 100% lạnh và lưu trữ ở -20 ° C bóng đá số ít nhất 1 giờ.
6. ly tâm ở 6.000 vòng / bóng đá sốút trong 20 bóng đá sốút.
7. Rửa viên với 70% ethanol.
8. viên khô và kết hợp.
9. Resuspend bóng đá số 100 ml ddh₂0.
10. Nồng độ cuối cùng là 10 mg/ml.