Phát hiện tỷ số bóng đá tại chỗ (ish) với fluorochromes

1. Remove cover slips by dipping the slides in a 2 X SSC solution and letting the cover slips fall from the slides.
2. rửa slide bằng cách sử dụng các bước sau (nhiệt độ và thời gian trong điều trị SSC có thể được tăng lên để giảm nền).

2 x SSC ở nhiệt độ phòng trong 5 phút,

2 x SSC ở 37 ° C trong 10 phút,

2 x SSC ở nhiệt độ phòng trong 5 phút và

1 x PBS ở nhiệt độ phòng trong 5 phút

1. Tranh (nhưng không bao giờ khô) trượt trên khăn giấy. Thêm 100 -L IgG phân số Rabbit chống bioTin (Enzo Chẩn đoán #43861, pha loãng 1: 100) và che bằng phiếu che phủ '22 x 40 'mm '22 x 40'. Ủ ở 37 ° C trong 30 phút.
2. Tháo các phiếu nắp bằng cách nghiêng các slide hoặc nhúng các slide trong cốc có 1 x pbs; Rửa trượt ba lần trong 1 x pbs (5 phút mỗi cái) ở nhiệt độ phòng. Thời gian và nhiệt độ của việc rửa có thể được thay đổi để điều chỉnh sự nghiêm ngặt.
3. Xóa các nắp đậy bằng cách nghiêng hoặc nhúng các slide vào cốc chứa 1 x pbs.
4. rửa slide trong 1 x pbs ở nhiệt độ phòng trong 5 phút.
5. Thoát trượt trên khăn giấy, thêm một lớp dung dịch antifade mỏng (10 mg/ml p-phenylenediamine trong glycerol) có chứa 1-M
6. FITC và propidium iodide sẽ được kích thích ở 450-490nm; Các tỷ số bóng đá có màu xanh lá cây màu vàng, trong khi các nhiễm sắc thể fluoresce màu đỏ.