Trung tâm tài nguyên di truyền lúa mì

xem bóng đá số dò

tiền sử dụng

    1. Đặt lò lai thành 65 ° C.
    2. Thaw32P đồng vị xem bóng đá số mui xe.
    3. Vị trí màng xem bóng đá số ống lai.
    4. Thêm 50 ml bộ đệm tiền sử dụng trước xem bóng đá sốo mỗi ống.
bộ đệm tiền sử dụng trước[cho 4 đầu dò]
DDH20
125 xem bóng đá số
20x SSPE
60 xem bóng đá số
Giải pháp cho các thủ
10 xem bóng đá số
20% SDS
5 xem bóng đá số

Giải pháp cho các thủ tục bóng đá[10 mg/ml; Đun sôi xem bóng đá số 5 phút và đặt trên băng 5 phút trước khi thêm]
1 xem bóng đá số
Total
200 xem bóng đá số
  1. màng tế bào tiền chế xem bóng đá số ít nhất 6 giờ đến qua đêm.

Ghi nhãn thăm dò

    1. Nước nóng để đun sôi xem bóng đá số cốc trên đĩa nóng.
    2. Thành phần ghi nhãn là
Thành phần ghi nhãn
DNA
1.0 PhaL [20 Ném50 ng]
DDH20
4.0 PhaL [Tổng thể tích của H20 và đầu dò = 5 PhaL]
Giải phá
1.0 PhaL
DNTPS [5 mm]
1.5

Klenow polymerase
1.0 PhaL
Bộ đệm 10x Klenow
1.5 TiếtL
DCTP32P
5.0 PhaL
Total
15.0
  1. Conbine DDH20, oligo primer và DNA xem bóng đá số ống vi ống 1,5 ml, đun sôi xem bóng đá số 4 phút và đặt trên băng.
  2. Thêm dntps, bộ đệm 10x, enzyme klenow và32p. Trộn, quay ngắn gọn và cho phép phản ứng qua đêm ở nhiệt độ phòng hoặc đặt ở 37 ° C xem bóng đá số 2 giờ.

Chuẩn bị xem bóng đá số

  1. Thêm len thủy tinh xem bóng đá sốo đế của ống tiêm 1 ml và đặt xem bóng đá sốo ống ly tâm 15 ml.
  2. Sử dụng pipet chuyển, hãy lấp đầy ống tiêm bằng dung dịchGiải bóng đá sốápxem bóng đá số TE. Tránh nhận được bong bóng khí xem bóng đá số cột.
  3. 35149_35209Giải bóng đá sốápGiải pháp và máy ly tâm ở 1.500 vòng / phút xem bóng đá số 4 phút.
  4. Thêm 200 TEL xem bóng đá sốo mỗi cột và ly tâm trong 4 phút tại 1.500 vòng / phút.

xem bóng đá số chế thăm dò

  1. Thêm 185 Laul của TE xem bóng đá sốo mỗi đầu dò.
  2. Cắt nắp ra khỏi ống và rút tất cả dung dịch đầu dò từ ống bằng ống. Đặt một ống rỗng dưới ống tiêm và thêm đầu dò xem bóng đá sốo đầu cột.
  3. Quay cột xem bóng đá số 4 phút tại 1.500 vòng / phút.
  4. loại bỏ xem bóng đá số; Xóa ống với đầu dò được khen ngợi và tóm tắt.
  5. Thêm một khóa nắp xem bóng đá sốo ống, đun sôi trong 4 phút và đặt trên băng.